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产品名称: | MF2490 NovaBlue大肠杆菌化学感受态细胞 |
产品型号: | MF2490 |
品牌: | |
产品数量: | |
产品单价: | 396.00 |
日期: | 2020-08-14 |
MF2490 NovaBlue大肠杆菌化学感受态细胞的详细资料
NovaBlue(DE3) Chemically Competent Cell
大肠杆菌化学感受态细胞
产品标签:
NovaBlue(DE3);OverExpress C43(DE3);BL21 (DE3);表达感受态细胞;pET表达载体;
货号 |
产品名称 |
规格 |
价格(元) |
MF2491-1000UL |
NovaBlue(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 |
10×100μl |
396 |
MF2491-5000UL |
NovaBlue(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 |
50×100μl |
1696 |
菌株描述
NovaBlue(DE3)菌株来源于K12菌株,具有高的转化效率,能同时用于普通质粒的构建以及蛋白的原核表达。NovaBlue(DE3)菌株具四环素抗性,recA和endA的突变有利于插入DNA的稳定和高纯质粒DNA的提取。lacZΔM15的存在使其能用于蓝白斑筛选。
NovaBlue(DE3)菌株含DE3区,说明其染色体上整合λ噬菌体DE3溶原体(其上携带lacUV5启动子调控的T7 RNA聚合酶基因),适用于靶基因克隆进入T7启动子表达载体比如pET系列的蛋白表达。
NovaBlue(DE3)菌株基因型:F`[ proA+B+ lacIq ZΔM15::Tn10 (TetR)] endA1 hsdR17(rk12-,mk12+) supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac(DE3)
产品描述
本品是大肠杆菌NovaBlue(DE3)菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达1×109 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。
产品包装
组分编号 |
组分名 |
货号(规格) |
|
MF2491-1000UL |
MF2491-5000UL |
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MF2491-A |
NovaBlue(DE3) Chemically Competent Cell |
10×100μl |
50×100μl |
MF2491-B |
Co |
10μl |
10μl |
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10g |
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Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 |
10g |
MS0018-10G |
Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 |
10g |
MS0017-5G |
Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 |
5g |
MS0014-1G |
Rifampicin, USP Grade利福平 |
1g |
MF2002-1G |
IPTG异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 |
1g |
附录I 蛋白诱导步骤(仅作参考)
1)从新鲜涂布平板上挑取一单克隆,转移到含相应抗生素的5ml LB液体培养基内。
2)37℃,200rpm摇菌培养过液。
3)将步骤2)中过夜培养的菌液吸取0.5ml接种到含相应抗生素的50ml LB液体培养基内(建议使用500ml三角瓶培养)。
4)37℃,150rpm摇菌培养直至OD600达到0.6~0.8(建议0.6,约2.5h)。
5)【可选】用移液枪吸取1ml培养物到干净的离心管内,置于冰上直至用于凝胶分析或保存在-20℃。这是非诱导的对照样本。
5)加入IPTG使其终浓度为1mM。目的蛋白的佳诱导时间可能在2~16h,依蛋白而异。
6)37℃,120rpm培养2~4h。为了确定目的蛋白的佳诱导时间,建议作一个时间周期优化实验,范围从2~16h。
7)将培养物冰浴10min。4℃,5,000 x g离心10min收集菌株。
8)吸掉上清,将沉淀保存在-20℃(也能保存在更低的温度)。
IPTG母液(1M)配制
称量2.38g IPTG(Mw: 238.30)溶于适量去离子水,充分溶解后,调整终体积到10ml,并过滤除菌,即得到1M ITPG母液。
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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NovaBlue大肠杆菌化学感受态细胞
NovaBlue大肠杆菌化学感受态细胞
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