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产品名称: MF2490 NovaBlue大肠杆菌化学感受态细胞
产品型号: MF2490
品牌:
产品数量:
产品单价: 396.00
日期: 2020-08-14

MF2490 NovaBlue大肠杆菌化学感受态细胞的详细资料

NovaBlue(DE3) Chemically Competent Cell

大肠杆菌化学感受态细胞

 

产品标签:

NovaBlue(DE3);OverExpress C43(DE3);BL21 (DE3);表达感受态细胞;pET表达载体;

 


货号

产品名称

规格

价格(元)

MF2491-1000UL

NovaBlue(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞

10×100μl

396

MF2491-5000UL

NovaBlue(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞

50×100μl

1696

 

菌株描述

NovaBlue(DE3)菌株来源于K12菌株,具有高的转化效率,能同时用于普通质粒的构建以及蛋白的原核表达。NovaBlue(DE3)菌株具四环素抗性,recA和endA的突变有利于插入DNA的稳定和高纯质粒DNA的提取。lacZΔM15的存在使其能用于蓝白斑筛选。

NovaBlue(DE3)菌株含DE3区,说明其染色体上整合λ噬菌体DE3溶原体(其上携带lacUV5启动子调控的T7 RNA聚合酶基因),适用于靶基因克隆进入T7启动子表达载体比如pET系列的蛋白表达。

NovaBlue(DE3)菌株基因型:F`[ proA+B+ lacIq ZΔM15::Tn10 (TetR)] endA1 hsdR17(rk12-,mk12+) supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac(DE3)


产品描述

本品是大肠杆菌NovaBlue(DE3)菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达1×109 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。


产品包装

组分编号

组分名

货号(规格)

MF2491-1000UL

MF2491-5000UL

MF2491-A

NovaBlue(DE3) Chemically Competent Cell

10×100μl

50×100μl

MF2491-B

Control Plasmid puC19,10pg/μl

10μl

10μl

 


 


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1g

 

附录I 蛋白诱导步骤(仅作参考)

1)从新鲜涂布平板上挑取一单克隆,转移到含相应抗生素的5ml LB液体培养基内。

2)37℃,200rpm摇菌培养过液。

3)将步骤2)中过夜培养的菌液吸取0.5ml接种到含相应抗生素的50ml LB液体培养基内(建议使用500ml三角瓶培养)。

4)37℃,150rpm摇菌培养直至OD600达到0.6~0.8(建议0.6,约2.5h)。

5)【可选】用移液枪吸取1ml培养物到干净的离心管内,置于冰上直至用于凝胶分析或保存在-20℃。这是非诱导的对照样本。

5)加入IPTG使其终浓度为1mM。目的蛋白的佳诱导时间可能在2~16h,依蛋白而异。

6)37℃,120rpm培养2~4h。为了确定目的蛋白的佳诱导时间,建议作一个时间周期优化实验,范围从2~16h。

7)将培养物冰浴10min。4℃,5,000 x g离心10min收集菌株。

8)吸掉上清,将沉淀保存在-20℃(也能保存在更低的温度)。

IPTG母液(1M)配制

称量2.38g IPTG(Mw: 238.30)溶于适量去离子水,充分溶解后,调整终体积到10ml,并过滤除菌,即得到1M ITPG母液。

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

 

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NovaBlue大肠杆菌化学感受态细胞
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